Human cornea conservation in coconut water solution / Conservação de córneas humanas em solução de água de coco

ABSTRACT Purpose: The aim of this study was to evaluate the physical and chemical characteristics of coconut water and to analyze the use of coconut water solution for the conservation of human corneas. Methods: This was an experimental and controlled study performed at the Eye Bank of the General Hospital of Fortaleza. The coconut water-based solution was prepared at the Goat Seed Technology Laboratory of the Department of Veterinary Medicine of the State University of Ceará. Discarded corneas from the Eye Bank were divided into two groups for sequential experiments: G1, coconut water-based solution (experimental group), and G2, conservative treatment with OPTISOL GS® (control group). The osmolality of corneas in G1 was analyzed sequentially at 275, 300, 325, 345, 365, and 400 mOsm/L. The viability of the corneas was determined by specular microscopy and biomicroscopy on the first, third, and seventh days. Results: Corneas preserved in a solution of 365 and 345 mOsm/L had a transparency of 8 mm until the third day and had diffuse edema in the periphery, central folds, and partial epithelium loss until the seventh day. The 365-mOsm/L solution was associated with the worst results during follow-up. Corneas placed in Optisol-GS retained their original aspects. Conclusions: Coconut water-based preservative partially maintained corneal transparency and epithelial integrity, especially during the first three days of follow-up. The coconut water-based solutions used were not effective for use as preservatives in a human eye bank.(AU)

RESUMO Objetivos: As características físico-químicas e o baixo custo da água de coco foram fundamentais para o este estudo. Analisar o uso de solução a base de água de coco como meio de conservação de córneas humanas em banco de olhos. Métodos: Estudo experimental e controlado realizado no Banco de Olhos do Hospital Geral de Fortaleza. Utilizou-se solução à base de água de coco preparada no laboratório de Tecnologia de Sêmen de Caprinos do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Estadual do Ceará. Foram usadas córneas de descartes divididas em dois grupos: G1 (Conservante com água de coco) - grupo experimental e G2 (grupo Conservante com OPTISOL GS®) grupo controle, em experimentos sequenciais. A osmolaridade do G1 foi analisada sequencialmente com 275, 300, 325, 345, 365 e 400 mOsm/L. A viabilidade das córneas foram realizadas por microscopia especular e biomicroscopia nos 1º, 3º e 7º dias. Resultados: As córneas em solução de 365 e 345 mOsm/L apresentavam transparência nos 8mm centrais até o 3º dia, com edema em toda periferia, dobras centrais e edema 2+, com perda parcial do epitélio até 7º dia, sendo o de maior osmolaridade com melhor transparência durante o seguimento. Grupo com 275, 300 e 400 mOsm/L, córnea opaca, edema difuso, perda total do epitélio no 3º dia. As córneas em Optisol mantiveram seus aspectos. Conclusões: O conservante à base de água de coco manteve em parte a transparência corneana e a integridade epitelial, especialmente nos primeiros 3 dias de seguimento. A solução conservante com água de coco nas formulações utilizadas não se mostrou eficaz para o uso em banco de olhos humanos.(AU)

Effect of refrigeration at -1°C on spermatozoa quality of domestic cats / Efeito da refrigeração a -1°C na qualidade de espermatozoides de gatos domésticos

The objective of this study was to evaluate the sperm quality obtained of domestic cats by electroejaculation and recovery of the tail of the epididymis after cooling at -1°C and 4°C for 24 and 48 hours. Twenty-nine adult cats (2 to 6kg) were used. Sperm collection was performed by electroejaculation (EEJ), and after 48 hours, the cats were orchiectomized, and sperm sample was obtained from the vas deferens and epididymis tail (EPD). The samples were diluted in ACP-117® extender, and the sperm characteristics were evaluated at three different moments: when still fresh, 24 and 48 hours after cooling. The objective of this study was to evaluate the sperm quality obtained of domestic cats by electroejaculation and recovery of the tail of the epididymis after cooling at -1°C and 4°C for 24 and 48 hours. Twenty-nine adult cats (2 to 6kg) were used. Sperm collection was performed by electroejaculation (EEJ), and after 48 hours, the cats were orchiectomized, and sperm sample was obtained from the vas deferens and epididymis tail (EPD). The samples were diluted in ACP-117® extender, and the sperm characteristics were evaluated at three different moments: when still fresh, 24 and 48 hours after cooling. In order to compare the two refrigeration temperatures, the first stage was to analyze if there was a difference between the harvesting techniques. After this, two experiments were conducted: in the first, sperm sample from 14 cats were used and the cooling was performed at -1°C; and in the second, sample from 15 cats were used and the sperm were refrigerated at 4°C. Sperm kinetics were evaluated by computerized analysis (CASA) and concentration by Neubauer chamber, spermatic morphology was evaluated by modified Karras staining, and membrane integrity was evaluated by eosin nigrosine. The results obtained were analyzed in R software, version 3.2.5 using the Mann-Whitney test for variables with abnormal distributions, considering significance at the level of 5%. In ejaculate samples, higher values of total morphological defects were observed after 24 and 48 hours of refrigeration at 4°C (P<0.022) compared to refrigeration at -1°C, using Friedman test. To quantify the decrease in sperm quality, parameter reductions were calculated among time points (F-24h/F-48h/24h-48h). In EPD samples, a greater reduction in sperm quality was detected after 24 hours of refrigeration at 4°C, both in motility and sperm kinetics and in the movement and velocity indices, compared to refrigeration at -1°C. Based on the results, it can be concluded that cooling of feline spermatozoa at -1°C for up to 48 hours was efficient in maintaining spermatic quality collected by EEJ and EPD, and it could be an alternative to spermatozoa cryopreservation in domestic felines.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade espermática de gatos domésticos obtidos por eletroejaculação e recuperação da cauda do epidídimo após a refrigeração a -1°C e a 4°C por 24 e 48 horas. Vinte e nove gatos adultos (2 a 6kg) foram utilizados. A colheita de espermatozoides foi realizada por eletroejaculação (EEJ) e, após 48 horas, os gatos foram orquiectomizados, e as amostras espermáticas foram obtidas a partir do ducto deferente e da cauda do epidídimo (EPD). As amostras foram diluídas em ACP-117® e as características espermáticas foram avaliadas em três momentos distintos: fresco, 24 e 48 horas após a refrigeração. Para ser possível comparar as duas temperaturas de refrigeração, a primeira etapa foi analisar se havia diferença entre as técnicas de colheita. Após isto, dois experimentos foram conduzidos: no primeiro, espermatozoides de 14 gatos foram utilizados e a refrigeração foi realizada a -1°C; e no segundo, amostras de 15 gatos foram utilizados e os espermatozoides foram refrigerados a 4°C. A cinética espermática foi avaliada por análise computadorizada (CASA), a concentração por câmara de Neubauer, a morfologia espermática foi avaliada pela coloração de Karras modificada, e a integridade da membrana foi avaliada por eosina nigrosina. Os resultados obtidos foram analisados no software R, versão 3.2.5, utilizando o teste de Mann-Whitney para variáveis com distribuições anormais, considerando significância ao nível de 5%. No ejaculado, maiores valores de defeitos morfológicos totais foram observados após 24 e 48 horas de refrigeração a 4°C (P<0,022) em comparação com refrigeração a -1°C, usando o teste de Friedman. Para quantificar a diminuição na qualidade espermática, as reduções dos parâmetros foram calculadas entre os pontos de tempo (F-24h/F-48h/24h-48h). Na EPD, uma maior redução na qualidade espermática foi detectada após 24 horas de refrigeração a 4°C, tanto na motilidade e na cinética espermática quanto nos índices de movimento e velocidade, em comparação com a refrigeração a -1°C. Com base nos resultados, pode concluir-se que a refrigeração dos espermatozoides felino a -1°C, até 48 horas, foi eficaz na manutenção da qualidade espermático colhidos por EEJ e EPD, e pode ser uma alternativa para a criopreservação de espermatozoides em felinos domésticos.(AU)

Use of the ACP® and BTS extenders for cooling at 15°C white-lipped peccary (Tayassu pecari) semen / Uso dos diluidores ACP® e BTS para refrigeração a 15°C de sêmen de queixada (Tayassu pecari)

Knowledge about reproduction of white-lipped peccary is of great importance to assist with the conservation of this species and enable its rational use in captivity. This study aimed to evaluate the effect of ACP-103®, ACP-116® and BTS semen extenders on sperm viability during cooling of Tayassu pecari semen. Five ejaculates from four adult males were chilled. The animals were submitted to the protocols of sedation and anesthesia for semen collection by the electroejaculation method. After collection, the semen was macro- and microscopically assessed and diluted to reach 35x106 spermatozoa/mL in each of the three different extenders tested. The fresh-extended semen was packed in a BotuFLEX® thermal box to keep samples at 15°C for 24 hours. After cooling, the following semen parameters were analyzed: sperm motility, functional and structural integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, chromatin condensation, and the thermoresistance test was performed. The parameters sperm motility, structural and functional integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, and chromatin condensation were preserved after use of the extenders tested, and were similar to those of in natura semen (p>0.05). Curvilinear velocity (VCL) (p<0.05) was the only parameter with reduced values after cooling regardless of the extender used. The percentage of sperm with normal morphology was greater in samples cooled using the BTS extender (p<0.05). The ACP-103®, ACP-116® and BTS extenders can be used for the cooling and preservation of white-lipped peccary semen at 15°C for 24 hours.(AU)

Para auxiliar na conservação da espécie e permitir o uso racional do queixada em cativeiro é de grande importância o conhecimento sobre a reprodução da espécie. Objetivou-se avaliar o efeito dos diluidores de sêmen ACP-103®, ACP-116® e BTS na viabilidade espermática durante a refrigeração do sêmen do Tayassu pecari. Foram refrigerados cinco ejaculados provenientes de quatro machos adultos. Os animais foram contidos com auxílio de puçá e submetidos ao protocolo de sedação e anestesia para realização da coleta de sêmen pelo método da eletroejaculação. Depois da coleta, o sêmen foi avaliado macro e microscopicamente e diluído para atingir 35x106 espermatozoides/mL em cada um dos três diferentes diluidores testados. O sêmen diluído foi acondicionado em caixa térmica BotuFLEX® para manter as amostras a 15°C por um período de 24 horas. Depois da refrigeração, os espermatozoides foram avaliados quanto aos parâmetros de movimento espermático, integridade funcional e estrutural das membranas espermáticas, atividade mitocondrial, condensação da cromatina e teste de termorresistência. Os diluidores testados preservaram as características cinéticas, a integridade estrutural e funcional das membranas espermáticas, a atividade mitocondrial e a condensação da cromatina semelhante ao sêmen in natura (P>0,05). O único parâmetro que reduziu com o processo de refrigeração independente do diluidor utilizado foi a Velocidade Curvilinear (VCL) (P<0,05). Foi observado aumento do percentual de espermatozoides morfologicamente normais nas amostras refrigeradas em BTS (P<0,05). Os diluidores ACP-103®, ACP-116® e BTS podem refrigerar e conservar o sêmen de queixada a 15°C por 24 horas.(AU)

Recovery of sperm after epididymal refrigeration from domestic cats using ACP-117c and Tris extenders / Recuperação de espermatozoides após refrigeração do epidídimo de gatos domésticos utilizando os diluidores ACP-117c e Tris

We aimed to compare fresh sperm and sperm cooled to 4ºC that had been recovered from the epididymides of cats using powdered coconut water (ACP-117c) and Tris extenders. Sixty epididymides were divided into 6 groups: 10 fresh epididymides were recovered using Tris (T0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using Tris (T2h); 10 were kept at 4°C/4h and recovered using Tris (T4h); 10 fresh were recovered using ACP-117c (A0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using ACP-117c (A2h), and 10 were kept at 4°C/4h and recovered using ACP-117c (A4h). The testis-epididymis complexes (TEC) control were not cooled. The others were cooled at 4°C for 2 or 4h. The epididymis was separated and the sperm was recovered by the modified flotation method. Sperm kinetic parameters were evaluated by a computer-system analysis, and vigor, viability, concentration, membrane function and morphology of the sperm were assessed under a light microscope. The progressive motility with ACP-117c declined after 2h of cooling, but did not differ between fresh and 4h. The vigor and membrane function were higher in A4h than A0h. The vigor at T2h and T4h were decreased compared to T0h. T0h was higher than A0h for vigor and sperm membrane function. However, after 4h of cooling, ACP-117c maintained a higher percentage of living cells. Feline epididymal sperm quality can be maintained to the degree necessary for artificial breeding programs following cooling and ACP-117c may be successfully used to recover cat sperm that have been cooled for up to 4h.(AU)

Objetivou-se comparar a qualidade de espermatozoides recuperados a fresco e após refrigeração a 4ºC do epidídimo de gatos domésticos utilizando-se os diluidores ACP-117c e Tris. Sessenta epidídimos foram distribuídos em seis grupos: 10 epidídimos a fresco com o Tris (T0h), 10 a 4°C/2h e recuperados com Tris (T2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com Tris (T4h), 10 epidídimos a fresco com o ACP-117c (A0h), 10 a 4 °C/2h e recuperados com ACP-117c (A2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com ACP-117c (A4h). Os complexos testículo-epidídimo (CTE) do controle não foram refrigerados. Os outros foram refrigerados a 4°C durante duas e quatro horas. Os epidídimos foram separados das demais estruturas, e os espermatozoides recuperados pela técnica de flutuação modificada. Os parâmetros cinéticos foram avaliados em um sistema computadorizado, e o vigor, a viabilidade, a concentração, a funcionalidade de membrana e a morfologia celular foram avaliados em microscopia de luz. A motilidade progressiva com ACP-117c declinou após duas horas de refrigeração, mas não diferiu entre a recuperação a fresco e após refrigeração por quatro horas. Vigor e integridade funcional da membrana celular foram significativamente superiores no grupo A4h em comparação ao A0h. O vigor espermático em T2h e T4h reduziu significativamente em comparação com T0h. T0h foi significativamente superior ao A0h quanto aos parâmetros de vigor e integridade funcional da membrana espermática, entretanto, após quatro horas de refrigeração, o ACP-117c apresentou um maior percentual de células vivas. Os espermatozoides epididimários de felinos domésticos conseguem manter a qualidade necessária para serem utilizados em programas de reprodução artificial após serem refrigerados e recuperados por meio da técnica de flutuação modificada, e o diluidor ACP-117c pode ser utilizado com sucesso para recuperação de células espermáticas refrigeradas de gatos por até quatro horas.(AU)

Evaluation of coconut water neutralized by different agents on the viability of human fibroblasts: an in vitro study / Avaliação da água de coco neutralizada por diferentes agentes na viabilidade de fibroblastos humanos: estudo in vitro

Objective: This study evaluated four types of pH adjustment of the coconut water (CW) on viability of human fibroblasts (HFF). Material and method: Natural and industrialized CW were adjusted to pH 7.0 using: (1) Sodium Hidroxide (NaOH), (2) Sodium bicarbonate (NaHCO3), (3) Triethanolamine (C6H15NO3), (4) 2-Amino-2-Methil-1-Propanol (C4H11NO). Fibroblasts were plated at 2×104/ well in 96 well plates and maintained in the CW solutions for 2 h and 4 h. Positive control was represented by HFF maintained in DMEM and the negative control by tap water. Cell viability was analyzed by MTT formazan method. Data were analyzed by 3-way ANOVA followed by Tukey's and Dunnet's test. Result: There are no significant effect on the cell viability regarding type of CW, period of evaluation, and the interactions between CW and period of evaluation, CW and pH adjustment method, pH adjustment method and period of evaluation (p>0.05). Conclusion The product used for CW pH adjustment did not influenced HFF viability, thought there are a tendency of better performance in natural CW.

Objetivo: Avaliar a eficácia de quatro tipos de substâncias usadas para ajuste do pH da água de coco (AC) sobre a viabilidade de fibroblastos humanos (HFF). Material e método: O pH da AC natural e industrializada foi ajustado para pH 7,0 utilizando: (1) Hidróxido de Sódio (NaOH), (2) bicarbonato de sódio (NaHCO3), (3) Trietanolamina (C6H15NO3), (4) 2-Amino-2- Methil-1-propanol (C4H11NO). Células HFF foram plaqueadas em 2×104 células/poço em placas de 96 poços e mantidas nas diferentes soluções de AC acima durante 2 h e 4 h. Controle positivo foi representado por HFF mantidas em DMEM e o controle negativo por água da torneira. A viabilidade celular foi avaliada pelo método de MTT Formazan. Os dados foram analisados por 3-way ANOVA seguido pelo teste de Tukey e Dunnett. Resultado: A viabilidade celular não é influenciada pelo período de avaliação, e as interações entre AC e período de avaliação, AC e método de ajuste de pH, método de ajuste de pH e período de avaliação (p> 0,05). Conclusão: O produto utilizado para ajuste do pH não interfere na viabilidade de FH, embora, haja uma tendência de melhor desempenho em AC natural.

Aloe vera na criopreservação do sêmen de tambaqui (Colossoma macropomum) / Aloe vera in the cryopreservation of tambaqui (Colossoma macropomum) sperm

This study aimed to evaluate the extract of Aloe vera (AV) associated or not with 10% Dimethylsulfoxide (DMSO) in cryopreservation of tambaqui semen. For the formation of the pools (n= 14), 30 males were hormonally induced twice. Each pool had the objective motility, curvilinear velocity, straight-line velocity, average path velocity and morphology analyzed before and after cryopreservation of semen. The means for cryopreservation were constituted of Powder Coconut Water-104 diluent added DMSO and/or AV (5 or 10%). After cryopreservation, motility, velocities and morphology were reduced significantly when compared to fresh semen. For sperm motility the best treatment was that using only DMSO (20,86±8,31) and DMSO + 5% AV (15.71±9.77). For the velocities, the worse treatment was DMSO+10% AV. Treatment with only the addition of DMSO had a significantly higher effect than others on percentage of morphologically normal sperm. The mean correlation found was between motilityand the rate of morphologically normal sperm (r = 0.687). In conclusion, the addition of AV does not provide greater protection for spermatozoa during cryopreservation.

Short-term preservation of Pecari tajacu ovarian preantral follicles using phosphate buffered saline (PBS) or powdered coconut water (ACP(r)) media / Preservação de folículos ovarianos pré-antrais de Pecari tajacu por curtos períodos utilizando meios à base de solução salina fosfatada tamponada (PBS) ou água de coco em pó (ACP(r))

We compare protocols for the short-term preservation of collared peccarie's ovarian preantral follicles (PFs) by using phosphate buffered saline- (PBS) or powdered coconut water- (ACP(r)) based medium. For morphology analysis each pair of ovaries collected from six females was divided into nine fragments. One fragment was destined for morphology analysis (histology and transmission electron microscopy - TEM), constituting the control group and the other fragments were placed in tubes with PBS or ACP(r), packed in 5 L Styrofoam boxes, stored for 4h, 12h, 24h, and 36h, and then analyzed. For viability analysis a pair of ovaries from two additional females was divided into nine fragments; one fragment was immediately destined for viability analysis (Trypan blue test) and the other fragments were stored as previously described, until 24h and then analyzed. After 4h storage in ACP(r) medium, the follicular integrity was similar to control (87.8% vs 94.4%, respectively); however, ultrastructural analyses revealed swollen mitochondria as the first signals of PF degeneration. It was observed that ACP(r) (66.7%) was more efficient than PBS (49.4%) to preserve the morphological integrity after 36h storage (P<0.05); however, no differences were observed on follicular viability (P>0.05). In conclusion, the use of the ACP(r) is recommended for the short-term preservation of Pecari tajacu preantral follicles...

Compararam-se protocolos para a preservação por curtos períodos de folículos ovarianos pré-antrais (PFs) de catetos, utilizando meios à base de solução salina tamponada (PBS) ou água de coco em pó (ACP(r)). Para a análise morfológica, cada par de ovários coletados de seis fêmeas foi dividido em nove fragmentos. Um fragmento foi destinado para a análise da morfologia (histologia e microscopia eletrônica de transmissão - MET), constituindo o grupo controle, e os demais fragmentos foram colocados em tubos contendo PBS ou ACP(r), acondicionados em caixas térmicas de poliestireno expandido de 5L, armazenados durante quatro, 12, 24 e 36 horas, e, então, analisados. Para a análise da viabilidade, pares de ovários de duas fêmeas adicionais foram divididos em nove fragmentos; um deles foi imediatamente destinado à análise da viabilidade (teste com azul de Trypan), os outros fragmentos foram armazenados como descrito previamente até 24h e, então, foram analisados. Após quatro horas de armazenamento em meio ACP(r), a integridade folicular foi similar ao grupo controle (87,8% vs. 94,4%, respectivamente); contudo, a análise ultraestrutural revelou mitocôndrias edemaciadas como os primeiros sinais de degeneração dos PFs. Foi observado que o ACP(r) (66,7%) foi mais eficiente do que o PBS (49.4%) em preservar a integridade morfológica após 36h (p<0,05); entretanto, nenhuma diferença foi observada para a viabilidade folicular (P>0,05). Em conclusão, o uso da ACP(r) é recomendado para a preservação por curtos períodos de folículos pré-antrais de Pecari tajacu...

Avaliação da qualidade microbiológica de água de coco comercializada em Fortaleza, CE / Evaluation of microbiological quality of coconut water commercialized in Fortaleza, Brazil

A adesão crescente a um estilo de vida mais saudável e a manutenção de boa forma do corpo vem impulsionando o aumento da procura de parcela da população a alternativas naturais para a alimentação. O objetivo desta pesquisa foi avaliar microbiologicamente as águas de coco comercializadas na cidade de Fortaleza. Neste estudo foram analisadas 30 amostras de água de coco comercializadas em diversos pontos de venda da cidade de Fortaleza. Em todas as amostras foram verificadas a presença de coliformes totais. Também foi verificada a presença de colônias de mesófilos e bolores e leveduras. Nenhuma amostra apresentou coliformes fecais. Foi constatado que 96,66% das amostras de água de coco analisadas estão impróprias para o consumo.

Bactérias resistentes a antimicrobianos em amostras de água de coco comercializada em Itabuna, Bahia / Antibiotic- resistant bacteria in coconut water samplessoldat Itabuna, Bahia / Bacterias resistentes a antimicrobianos en muestras de agua de coco comercializada en Itabuna, Bahia

A água de coco tem sido comercializada in natura nos últimos anos porambulantes que utilizam carros adaptados para seu armazenamento. Essa prática acaba aumentando os riscos de contaminação por microrganismos, uma vez que a higienização dos carros e utensílios quase nunca é feita corretamente. A presente pesquisa visou estudara qualidade microbiológica e o perfil de resistência aos antibióticos das bactérias isoladas de águas de coco comercializadas por ambulantes no município de Itabuna, Bahia. As amostras foram analisadas para contagem total de Aeróbios Mesófilos, Contagem Total de Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Salmonella, Coliformes Totais e Termotolerantes incluindo E. coli. Também foram analisados a superfície dos carrinhos, os utensílios utilizados para a perfuração do coco e as mãos dos vendedores. Durante a coleta, foi aplicado umquestionário sobre noções de boas práticas de fabricação, higiene pessoal e segurança alimentar. Os carrinhos e 38,8% das amostras de água apresentaram contagens significativas para Enterobacteriaceae. Para coliformes termotolerantes estavam acima do estabelecido pelaAgência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), 22,2% das amostras de água; para aeróbios mesófilos foi encontrada uma média de 8 x 105 UFC/mL. Não foi detectada a presença de Salmonella. Já Escherichia coli foi detectada em uma amostra e Staphylococcus aureus em duas. As bactérias isoladas e identificadas da água de coco apresentaram resistência a alguns antibióticos, sendo as gram negativas resistentes a pelo menos 5 antibióticos de classes diferentes. Dos entrevistados, 72,2% não sabiam o que é segurança alimentar e 61,1% desconheciam o que são microrganismos e os riscos que podem causar à saúde humana. Apesar de 88,9% informarem que conheciam as Boas Práticas de Fabricação (BPFs) e Higiene, manipulavam concomitantemente o dinheiro e a água de coco. Concluiu-se que os manipuladores ambulantes de água de coco da cidade não possuem capacitação quanto as BPF, o que contribuiu para a contaminação das amostras. As bactérias isoladas mostraram um perfil de resistência a vários antibióticos.

Coconut water has been commercialized in a natural way by street vendors in vehicles adapted for its storage. This fact increases the risk of microbiological contamination since hygiene of vehicles and tools is rarely carried out in a proper way. The aim of this work was to study the microbiological quality and the antibiotic resistance profile of bacteria isolated from coconut sold by street vendors in Itabuna, Bahia. The samples of mesophilic aerobic bacteria, Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Salmonella, and thermotolerant coliforms, including E. coli were counted through enumeration. The surfaces of the vehicles were also analyzed, as well as tools used to open coconuts and the hands of the street vendors. During sampling, a survey was carried out about notions of Good Manufacture Practices (GMP), personal hygiene and food safety. Vehicles and the 38.8% of the samples presented significant numbers of Enterobacteriaceae. For thermotolerant coliforms, counts were higher than that established by the National Agency for Sanitary Surveillance (ANVISA), 22.2% of the water samples and for mesophilic aerobic bacteria a mean of 8 x 105 UFC/mL was found. No Salmonella was detected. Escherichia coli was found in one sample whereas Staphylococcus aureus in two. Microorganisms isolated presented resistance to several antibiotics, being Gram negative isolates resistant to at least 5 antibiotics of different class. From the vendors interviewed, 72.2% of them did not know what food safety was and 61.1% did not know what microorganisms are and the risks for human health. Although 88.9% knew about Good Manufacture Practices (GMP) and hygiene, they manipulated money and coconut water simultaneously. We conclude that street vendors of coconut water do not have trainingrelated to GMP, which contributes to the contamination of the samples. Isolated bacteria displayed a diversified profile of resistance to antibiotics.

El agua de coco ha sido comercializada de forma natural en los últimos años por vendedores ambulantes que utilizan vehículos adaptados para su almacenamiento. Esa práctica aumenta los riesgos de contaminación por microorganismos, ya que la higiene de los vehículos y de los utensilios casi nunca es realizada de forma adecuada. Este estudio tuvo como objetivo el estudio de la calidad microbiológica y el perfil de resistencia a los antibióticos, de las bacterias aisladas de agua de coco, comercializadas por vendedores ambulantes, en el municipio de Itabuna, Bahía. Las muestras fueron analizadas para total de Aeróbios Mesófilos. Recuento total de Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Salmonella, Coliformes Totales y Termotolerantes incluyendo E. coli. Se analizaron también las superficies de los vehículos, los utensilios utilizados para la perforación de los cocos y las manos de losvendedores. Durante la recolecta, se aplicó un cuestionario sobre las nociones de buenas prácticas de fabricación, higiene personal y seguridad alimentaria. Los vehículos, y el 38,8% de las muestras de agua, presentaron recuentos significativos de Enterobacteriaceae. Con respecto a los coliformes termotolerantes, los recuentos estuvieron por encima de lo establecido por la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria (ANVISA), 22,2% de las muestras de agua; para aerobios mesófilos se encontró un promedio de 8 x 105 UFC/mL. No se detectó la presencia de Salmonella. Ya la Escherichia coli fue detectada en una muestra yStaphylococcus aureus, en dos. Los microorganismos aislados e identificados del agua de coco, presentaron resistencia a diversos antimicrobianos, siendo los Gram negativos resistentes, al menos, a 5 antibióticos de diferentes clases. De los entrevistados, el 72,2% no sabía lo que es la seguridad alimentaria y el 61,1% desconocían lo que son los microorganismos y los riesgos que presentan para la salud humana. A pesar de que el 88,9% conocía las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM) e Higiene, manipulaban simultaneamente el dinero y el agua decoco. Se concluye que los vendedores ambulantes de agua de coco de la ciudad no poseen capacitación en relación a las BPM, lo que contribuye para la contaminación de las muestras. Las bacterias aisladas mostraron un perfil de resistencia a varios antibióticos.

Germinação de embriões e crescimento inicial in vitro de macaúba / Germination and early growth of embryos of macaúba seedlings

A macaúba é uma palmeira oleaginosa altamente produtiva e seu óleo pode ser usado na produção de biocombustíveis. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a influência de concentrações dos sais do meio de cultura MS e de água de coco na germinação in vitro de embriões zigóticos de macaúba e no crescimento inicial de plântulas. Os embriões foram excisados e em seguida inoculados em tubos de ensaio contendo 15mL de meio de cultura MS nas concentrações de 50 e 100 por cento de sais minerais, acrescidos de água de coco (0, 50, 100 e 150mL L-1). As culturas foram mantidas em sala de crescimento com irradiância em torno de 42W m-2, temperatura de 25±2°C e fotoperíodo de 16 horas. Maior porcentagem de germinação de embriões de macaúba foi obtida aos 60 dias, em meio MS, na concentração original dos sais. O crescimento e a conversão de plântulas viáveis ou normais, passíveis de serem aclimatizadas, requerem metade da concentração de sais do meio MS suplementado com 50mL L-1 de água de coco.

The macaw is a palm oleaginous that it is highly productive and in which their oil can be used to produce biofuels.This study aimed to evaluate the influence of concentrations of minerals of the culture medium MS and coconut water germination in vitro of zygotic embryos of macaw and initial growth of seedlings. The embryos were inoculated in test tubes containing 15mL of culture medium MS in concentrations of 50 and 100 percent of minerals, plus coconut water (0, 50, 100 and 150mL L-1). The cultures were kept in room for growth with irradiance around 42W m-2, at 25±2°C and photoperiod of 16 hours. Higher percentage of germination of embryos of 'macaúba' was obtained at 60 days in MS medium in the original concentration of salts. The growth and conversion to viable seedlings or normal, which can be acclimatized, require half the concentration of salts of MS medium supplemented with 50mL L-1 coconut water.

EFECTO INDUCTOR DEL AGUA DE COCO SOBRE LA GERMINACIÓN DE SEMILLAS Y BROTAMIENTO DE LOS CORMOS DE LA HIERBA DE LA EQUIS Dracontium grayumianum / Inductive Effect of Coconut Water on Germination of Seeds and Sprouting of Corms of Dracontium grayumianum

El objetivo de este estudio fue determinar el efecto promotor de agua de coco, ácido giberélico, de la estratificación fría y escarificación mecánica, sobre la germinación de semillas de Dracontium grayumianum, y el efecto de ácido giberélico y agua de coco sobre el brotamiento de cormos de la misma especie. Las semillas no sometidas a los tratamientos inductores fueron incapaces de germinar, pero la inmersión en agua de coco tuvo efectos notables, produciendo un porcentaje de germinación del 50%, superior al efecto logrado con los demás tratamientos. El endospermo líquido del coco también tuvo efecto favorable sobre el brotamiento de cormos bajo condiciones de vivero, al igual que el tratamiento con una solución de ácido giberélico. Este es el primer reporte del uso de agua de coco como agente promotor de la germinación de semillas con alto nivel de latencia, lo que coloca este recurso como una alternativa adicional, altamente eficaz y de bajo costo, para ser utilizado en estrategias de propagación vegetal de especies con semillas de latencia profunda.

The objective of this study was to determine the promotional effect of coconut water, gibberellic acid, cold stratification and mechanical scarification on seed germination of Dracontium grayumianum, and the effect of gibberellic acid and coconut water on the sprouting of corms of the same species. The seeds without the inductive treatment were unable to germinate, but the immersion in coconut water had significant effects, producing a germination rate of 50%, higher than the effect achieved with other treatments. The liquid endosperm of coconut also had favorable effect on the sprouting of corms under nursery conditions, like the treatment with gibberellic acid solution. This is the first report of the use of coconut water as a promoter of seed germination with high latency, which places this resource as an additional alternative, highly efficient, and cost-effective, for use in plant propagation strategies of species with seeds of deep dormancy.

Uso do diluente água de coco em pó (ACP-103®) na conservação prolongada do sêmen do varrão: avaliação in vitro e in vivo / Use of powder coconut water as extender (ACP-103®) for boar semen longer preservation: in vitro and in vivo evaluations

O sêmen de oito reprodutores foi coletado e de cada ejaculado separou-se um total de 1,75x10(9)sptz, com concentração de 35x10(6)sptz/mL. Usou-se o Beltsville Thawing Solution (BTS) como controle para testar o diluente água de coco em pó (ACP). O dia de coleta foi o dia zero (D0), sendo o sêmen conservado durante cinco dias, com análises diárias no D0 e nos quatro dias seguintes (D1, D2, D3 e D4). A avaliação da qualidade espermática baseou-se nos resultados do vigor espermático, da porcentagem de células móveis, da morfologia espermática, da integridade da membrana plasmática e dos resultados de fertilidade. As avaliações do vigor espermático (4,1) e da porcentagem de espermatozoides móveis (91 por cento) ficaram acima dos parâmetros mínimos exigidos (3,0 e 70 por cento) para sua utilização em programas de inseminação artificial, pois não houve influência sobre as variáveis analisadas pelo protocolo experimental. O resultado médio da resistência osmótica foi de 71,3 por cento de espermatozoides com cauda enrolada. Não houve diferenças entre os dois diluentes testados para a característica células com acrossoma intacto (BTS = 67,1 por cento; ACP = 71,2 por cento). O sêmen diluído em ACP apresentou maior número de células vivas (77,7 por cento) com membrana plasmática íntegra (74,2 por cento) após a conservação. A escolha do diluente ACP é aconselhável para uso de rotina em laboratórios que trabalhem com conservação de sêmen suíno. Apesar dos bons resultados in vitro obtidos com o diluente ACP, o BTS apresentou os melhores resultados de fertilidade, 86,7 por cento e 96,7 por cento, respectivamente.

The semen of eight boars was collected and a total of 1.75x10(9) spermatozoa were separated from each ejaculate, obtaining a concentration of 35x10(6)sptz/mL. The Beltsville Thawing Solution (BTS) was used as control, being tested the powder coconut water as extender (PCW). The day of collection was considered day zero (D0), and the semen was conserved for five days, with analyses on D0 and on four subsequent days (D1, D2, D3, and D4). The evaluation of spermatic quality was based on the results of spermatozoa vigour, cells motility, spermatic morphology, plasmatic membrane integrity, and fertility. The evaluations of the in natura semen presented mean values of spermatozoa vigour (4.1) and mobile spermatozoids percentage (91 percent) above the demanded minimum parameters (3.0 and 70 percent) for its use in artificial insemination programs without influencing on the analyzed variables. The mean results of the osmotic resistance were excellent, with 71.3 percent of spermatozoids with coiled tail. There were no differences between the two extenders tested for the characteristic cells with intact acrossome (BTS = 67.1 percent; PCW = 71.2 percent). The semen diluted in PCW extender presented a higher number of alive cells (77.7 percent) with a complete plasmatic membrane (74.2 percent) after conservation period. The choice of PCW extender is advisable for the routine use in laboratories that work with conservation of swine semen. In spite of the good results in vitro with the PCW extender, the BTS presented the best fertility results, 86.7 percent and 96.7 percent, respectively.

Conservação do sêmen e liquefação do coágulo seminal de macaco-prego (Cebus apella) em água de coco em pó (ACP-118®), em diferentes temperaturas / Semen conservation and seminal clot liquefaction of capuchin monkey (Cebus apella) in powdered coconut water extender (PCW) at different temperatures

O objetivo do estudo foi avaliar a água de coco em pó (ACP) na conservação do sêmen e liquefação do coágulo seminal de Cebus apella. O sêmen de seis machos adultos foi coletado por eletroejaculação (EEJ), diluído em solução à base de ACP-118® e submetido à incubação em banho-maria a 33, 35 e 37°C, por 24 horas. Avaliou-se a integridade espermática por meio da coloração eosina-nigrosina a cada uma hora durante as seis horas iniciais e após 24 horas de incubação. Os volumes médios e as concentrações espermáticas das frações coagulada e líquida foram de 0,20±0,02 e 0,20±0,10mL; 1,1±0,3x10(8) e 1,3±0,9x10(7) espermatozoides mL-1, respectivamente. Somente em uma amostra da fração líquida foram verificados espermatozoides com motilidade (20 por cento) e vigor (4), perdurando por 40 minutos. A maior parte do coágulo liquefez em ACP-118® após 12 horas de incubação. O melhor tratamento observado foi sob 33°C, por manter até 47±12,8 por cento de espermatozoides vivos após 24 horas. Conclui-se que o diluente à base de ACP é eficiente na liquefação do coágulo seminal e na manutenção da integridade espermática até 24 horas após a EEJ, nas temperaturas de 33, 35 e 37°C.

The aim of this study was to evaluate the powdered coconut water (PCW) in the semen conservation and seminal clot liquefaction. The semen of six adult male Cebus apella was collected by electroejaculation (EEJ), diluted in ACP-118® extender and stayed in water bath at 33, 35 and 37°C for 24 hours. The sperm integrity was evaluated by eosin-nigrosine staining every one hour during the six initial hours and after 24 hours of incubation. The average volumes and sperm concentrations of clotted and liquid fractions were 0.20±0.02 and 0.20±0.10mL, 1.1±0.3x108 and 1.3±0.9x107 sperm mL-1, respectively. Immediately after collection, only in a sample of liquid fraction was observed 20 percent motility and vigor 4, which stopped after 40 minutes. Most of the clot was liquefied in ACP-118® after 12 hours of incubation. The best observed treatment was 33°C, because it kept 47±12.8 percent of sperm integrity after 24 hours. It was concluded that the PCW extender is effective in the liquefaction of seminal clot and maintenance of sperm viability 24 hours after the EEJ at 33, 35 and 37°C.

Condições higiênico-sanitárias na comercialização de água de coco, por ambulantes do município de Teixeira de Freitas, BA / Hygienic-sanitary condition in the commercialization of coconut water, by walking in the city of Teixeira de Freitas, BA

Atualmente, o consumo de água de coco verde no país é crescente e significativo. A atividade ambulante geralmente é exercida por pessoas não treinadas, podendo servir de veículo de contaminação dos alimentos e bebidas. Este trabalho tem como objetivo geral investigar as condições higiênico-sanitárias dos vendedores ambulantes de água de coco comercializada em carrinhos ambulantes com serpentina para refrigeração nos logradouros do município de Teixeira de Freitas-BA. O método foi um guia de verificação ou check-list do tipo entrevista, sobre a prática de higiene-sanitária no que diz respeito ao produto a ser comercializado. Ao avaliar as Boas Práticas de Higiene dos ambulantes, obtiveram-se os seguintes resultados: 12,5% classificados como PÉSSIMO; 37,5% como RUIM; 43,8% apenas REGULAR e somente 6,2% classificados como BOA. Nenhum foi classificado como EXCELENTE.

Qualidade higiênico-sanitária da água de coco consumida na região litorânea da cidade do Rio de Janeiro / Sanitary quality of coconut water consumed in Rio de Janeiro

Uma vez extraída, a água de coco (Cocos nucifera) deve ser consumida imediata, ou refrigerada, devido aos riscos da contaminação microbiana. O presente trabalho apresenta dados sobre a contaminação microbiana de água de coco comercializada na região litorânea da cidade do Rio de Janeiro. Os parâmetros microbiológicos contidos na resolução RDC 12 de 2 janeiro de 2001 (ANVISA) e, além destes, o número de microrganismos mesófilos aeróbios, bolores e leveduras e coliformes totais foram determinados. A metodologia para a análise de 90 amostras de água de coco seguiu o Standard Methods for the Microbilogical Examination of Foods da American Public health Association (APHA). A água de coco consumida no local, extraída por corte ou perfuração, apresentou coliformes a 45°C acima do limite legal em 26,6% das amostras e microrganismos mesófilos aeróbios >2,0 X 10 ufc/mL, em 40,0% das amostras. A água refrigerada por serpentina apresentou coliformes a 45°C em 50,0% das amostras e microrganismos mesófilos aeróbios >2,0 x10 ufc/mL em 40,0% das amostras. Em ambas, o número máximo de bolores e leveduras não ultrapassou 2,0 X 10³ ufc/mL. Nas amostras em embalagem tetra pak não se detectou coliformes e o número de microrganismos mesófilos situou-se entre zero e >2,0 X 10 ufc/mL e o de bolores e leveduras não ultrapassou a 1,0 X 10ufc/ml. Salmonella sp não foi detectada em nenhuma amostra. Concluiu-se que a água de coco em embalagem tetra pak apresentava a melhor qualidade microbiológica e a refrigerada pelo sistema de serpentina apresentava a maior contaminação, sugerindo falha na higienização do sistema de extração ou de refrigeração.

Constituents and antioxidant activity of two varieties of coconut water (Cocos nucifera L) / Constituintes químicos e atividade antioxidante de duas variedades de água de coco (Cocos nucifera L)

Uma análise dos componentes da água-de-coco (Cocos nucifera L.) de duas variedades da fruta (verde e amarelo) por hidrodestilação e extração com solvente, mostrou a presença de álcoois, cetonas, tióis, ácidos carboxílicos, fenóis, e ésteres. Significativa atividade antioxidante foi observada, usando o método DPPH, para as amostras obtidas por hidrodestilação e extração de éter de petróleo para ambas as variedades do coco.

An analysis of the constituents of coconut (Cocos nucifera L.) water from two fruit varieties (green and yellow) by hydrodistillation and solvent extraction showed the presence of alcohols, ketones, thiols, carboxylic acids, phenols, and esters. Substantial antioxidant activity was observed, using the DPPH assay, for the samples obtained by hydrodistillation and petroleum ether extraction of both coconut varieties.

Viabilidade do sêmen caprino lavado e não lavado diluído em água de coco, resfriado e armazenado a 4oC

A conservação do sêmen por períodos curtos é dependente da redução reversível da motilidade e da atividade metabólica dosespermatozóides a baixas temperaturas. Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da época de coleta de sêmen sobre aviabilidade do sêmen lavado e não lavado, resfriado e armazenado a 4oC em diluidor água de coco. Foram utilizados 40ejaculados provenientes de quatro caprinos da raça Saanen. Após a coleta, o sêmen foi avaliado quanto a concentraçãoespermática e diluído a uma concentração final de 200 x 106 sptz/ml. O sêmen diluído foi dividido em duas alíquotas iguais, euma delas foi resfriada a 4oC (sêmen não lavado), a outra metade foi centrifugada para a remoção do plasma seminal,novamente diluída em água de coco e em seguida resfriada a 4oC (sêmen lavado). Assim, o sêmen foi avaliado a 0, 24, 48 e72 horas de conservação a 4oC quanto a motilidade individual progressiva (MIP) e porcentagem de espermatozóides móveis(PEM) por meio do teste de termorresistência (TTR) a 37oC aos 5, 60 e 120 minutos de incubação. A taxa de degradação damotilidade (TDM) foi calculada ao final da incubação. Os parâmetros de MIP, PEM e TDM foram submetidos a ANOVA e Fisher´sPLSD a 5%. A MIP no sêmen lavado foi superior (p 0,001) até 48 horas de conservação a 4oC no período chuvoso e a 0h noperíodo seco, não ocorrendo diferença na MIP nos outros tempos avaliados. Da mesma fo